發(fā)布時間:2022-02-06
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鄭州慧工介紹了這次實驗所需的儀器和設備。
蒸汽滅菌器、生化培養(yǎng)箱、電熱恒溫鼓風干燥箱DHG-9240 a、可見分光光度計22pc、旋轉蒸發(fā)器Re-2000B。
2 鄭州慧工儀器介紹實驗方法。
2.1芹菜葉精油的提取及工藝優(yōu)化
將芹菜葉洗凈,自然風干48小時,然后放入恒溫鼓風干燥箱中25干燥24小時,切成塊,裝入保鮮袋中稱重,密封備用。根據(jù)正交試驗法,以料液比、浸泡時間和蒸餾時間為3個因素,將各因素設置為3個水平,確定芹菜葉精油的最佳提取條件。
2.2 mic值的確定
MIC為最低抑制濃度,即體外培養(yǎng)18 ~ 24小時后,培養(yǎng)基能抑制可見細菌生長的最低藥物濃度。用平板法測定了芹菜葉精油的最低抑菌濃度。將芹菜葉精油用低熔點石油醚稀釋至一系列濃度,加入培養(yǎng)基,混合液中混勻,在固化的培養(yǎng)基,表面均勻涂抹0.1mL菌懸液,在相應的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)各實驗菌株,每種濃度重復試驗三次。
3 鄭州慧工儀器分析介紹抑菌圈的測定
用瓊脂擴散法測定抑菌圈直徑。將0.1毫升菌懸液均勻涂在固化的培養(yǎng)基,蓋片表面,室溫下干燥5分鐘,將20 l不同濃度的芹菜葉精油(100、200、300 mg/ml)滴入每個已滅菌的濾紙片(直徑6.0mm)中,自然風干,用無菌鑷子將樣品片輕輕粘在平板表面,每個平板上粘3個試片,以3片石油醚為計數(shù)器。在相應的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)實驗菌株,并測量抑菌直徑。這個實驗重復了三次。
芹菜葉精油的最佳提取條件為:料液比1:8,浸泡時間0.5h,蒸餾時間3h。兩個品種的芹菜葉精油提取率相近。兩個品種的芹菜葉精油抑菌效果略有差異,但對革蘭氏陽性菌均有明顯的抑菌效果。
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